纳米颗粒和脂质体做
TEM,容易卡在制样上:浓度不合适、缓冲液盐分高、载网亲水化不到位、染色时间控制不好,都会导致背景结晶、颗粒堆积或囊泡塌陷。外包给专业平台做负染色
TEM,确实能明显降低试错成本。
为什么脂质体/纳米颗粒负染容易翻车
浓度难把握:太稀找不到颗粒,太浓容易重叠、堆积。
缓冲液干扰:PBS、Tris、甘油、蔗糖容易在干燥后形成盐结晶,污染图像。
载网亲水性不足:没有辉光放电或等离子清洗,液滴铺展不均匀,吸附效果差。
染色剂选择不当:磷钨酸、醋酸铀、硅钨酸对不同样品适配性不同,pH 也会影响形貌。
脂质体易塌陷:干燥过程中渗透压和离子强度变化会让囊泡变扁、破裂,甚至铺成连续膜。
外包前建议准备好这些信息
样品类型:脂质体、外泌体、聚合物纳米颗粒、LNP、病毒样颗粒等。
样品状态:液体或粉末,当前浓度、缓冲液体系、是否含甘油/蔗糖/PBS。
观察目的:看粒径分布、形貌完整性、包封结构,还是做 QC 放行。
是否需要同步做 DLS/NTA:外包平台常建议先用粒径和浓度数据辅助制样优化。
是否需要 Cryo-TEM:如果必须看原始球形、双层膜或内部结构,负染只能做初筛,Cryo-TEM 更接近真实状态。
常见送样要求
液体样品通常提供 100–200 μL,浓度尽量合适,避免现场反复稀释。
脂质体/外泌体建议尽量避开高盐缓冲液,可置换成超纯水或低浓度挥发性缓冲液。
若样品需低温保存,建议冰袋或干冰运输,并提前说明保存条件。
交付时重点核对
负染色剂种类和 pH。
载网类型:碳膜铜网、超薄碳膜、微栅等。
是否做辉光放电/亲水化处理。
每个样品拍摄张数、放大倍数和是否含粒径统计。
是否提供原始图片和典型视野说明。
如果这是面向客户的服务页,可以这样写:
纳米颗粒/脂质体 TEM
制样难?负染色测试省心外包。针对脂质体、外泌体、LNP、聚合物纳米颗粒等低衬度样品,提供载网亲水化、浓度优化、缓冲液置换、负染色筛选和 TEM
成像一站式服务,快速获得形貌、粒径分布和结构完整性信息。
来源:网络