ITC仪器包含参比池和样品池，其中参比池中加入稀释溶液作为对照，彼此通过绝热装置隔开。在恒温条件下，注射器中的药物溶液滴定到含有目的蛋白的样品池中，两种物质相互作用，释放或吸收的热量与结合量成正比，ITC工作原理如下图所示。当样品池中的蛋白溶液被药物分子饱和时，热量信号逐渐减弱，最后只能观察到滴定的背景溶液热量。

简单地说，就是指将一种反应物配制成澄清溶液放在一个温控样品池中，通过一个热电偶回路与参比池偶联，另一种反应物作为配体置于注射器中。其中，样品池和参比池通过绝热装置隔开，但保持环境条件相同。在恒定温度下，注射器以一定速度向样品池中不断滴加配体，注射器还具有搅拌功能，反应一定时间，仪器测量样品池的热量变化并使其与参比池平衡，显示为一个吸热或放热的峰。放热反应触发恒温功率的负反馈，而吸热反应则触发恒温功率的正反馈来保持温

1、能够在单个实验中确定多个热力学结合参数(即化学计量、缔合常数和结合焓);

2、对被研究体系的溶剂性质、光谱性质和电学性质等没有任何限制条件，即具有非特异性的独特优势;

3、样品用量小，灵敏度高且精确度高;

4、可测的亲和力范围从10-2 M～10-12 M;

5、实验时间较短，且操作简单(高自动化);

6、无需通过荧光标记或固定化技术对结合配偶体进行修饰;

7、测量时不需要制成透明溶液;

8、不破坏样品结构，量热实验完毕，还可以进行后续生化分析。

1、蛋白质-蛋白质相互作用(包括抗原-抗体相互作用和分子伴侣-底物相互作用);2、蛋白质折叠/去折叠;

3、蛋白质-小分子相互作用以及酶-抑制剂相互作用;

4、酶促反应动力学;

5、药物-DNA/RNA相互作用;

6、RNA折叠;

7、蛋白质-核酸相互作用;

8、核酸-小分子相互作用;

9、核酸-核酸相互作用;

10、生物分子-细胞相互作用。