微量热泳技术的应用领域

　　微量热泳技术(Microscale Thermophoresis, MST)是一种高灵敏、低样品消耗、溶液相的生物分子相互作用分析技术，通过检测分子在温度梯度场中的定向迁移行为(热泳)来定量结合亲和力(KD)。自2010年由德国 NanoTemper 公司商业化以来，已在药物发现、基础生物学和诊断开发中广泛应用。

　　主要应用领域

　　1. 药物筛选与先导化合物优化

　　测量小分子抑制剂与靶蛋白的 KD(pM–mM 范围);

　　优势：可直接在含 DMSO、甘油、去垢剂的缓冲液中测试;

　　示例：激酶、GPCR、蛋白-蛋白相互作用抑制剂。

　　2. 核酸-配体相互作用

　　DNA/RNA 与小分子、蛋白、金属离子结合;

　　可用 SYBR Gold 等嵌入染料免标记检测核酸。

　　3. 离子/辅因子依赖性研究

　　测量 Ca²⁺、Zn²⁺、ATP 等对蛋白构象或结合的影响;

　　无需分离步骤，直接在含离子缓冲液中进行。

　　4. 复杂介质中的结合分析

　　血清、细胞裂解液、尿液中直接测 KD(抗干扰能力强);

　　应用于生物药 PK/PD 研究(如抗体-抗原在血清中结合)。

　　5. 蛋白质稳定性与变构效应

　　通过热泳信号变化监测：

　　热/化学变性;

　　配体诱导的构象变化;

　　蛋白聚集。

　　6. 病毒-宿主相互作用

　　如 SARS-CoV-2 Spike 蛋白与 ACE2 的结合;

　　可评估突变株亲和力变化。

       来源：网络