生物层干涉测量bli测定实验流程

　　生物层干涉测量(Bio-Layer Interferometry, BLI)是一种无标记、实时、高通量的生物分子相互作用分析技术，广泛应用于药物开发、抗体表征、蛋白-配体结合、病毒-受体识别等领域。其原理与表面等离子共振(SPR)类似，但采用光纤传感器探针设计，操作更简便、成本更低。

　　典型实验流程

　　步骤 1：传感器水化

　　将干燥传感器浸入缓冲液 10 分钟，恢复水合层。

　　步骤 2：基线(Baseline)

　　浸入缓冲液，记录 60–120 秒，信号稳定。

　　步骤 3：配体固定(Loading)

　　浸入含配体(如生物素化抗体)溶液，固定至目标信号(如 1.0 nm)。

　　步骤 4：二次基线

　　回缓冲液，洗去未结合配体。

　　步骤 5：结合(Association)

　　浸入不同浓度分析物(如抗原)，记录结合信号随时间上升。

　　步骤 6：解离(Dissociation)

　　回缓冲液，观察复合物解离。

　　步骤 7：再生(Regeneration，可选)

　　浸入再生液(如 10 mM Glycine pH 1.5)，去除结合物，重复使用传感器。

　　⏱️ 单次运行时间：10–30 分钟(取决于动力学快慢)。

       来源：网络