生物膜层干涉技术(Bio-Layer Interferometry,
BLI)是一种免标记(label-free)、实时的生物分子相互作用分析技术,广泛应用于药物研发、抗体表征、疫苗开发、蛋白-小分子结合研究等领域。
典型应用领域
1. 抗体-抗原结合动力学
测定 kon(结合速率)、koff(解离速率)、KD(亲和常数)
示例:
Human CD64 + Herceptin → KD = 6.98 nM(ForteBio Octet Red96e)
2. 疫苗研发
纳米颗粒疫苗:将 RBD 蛋白偶联至不同尺寸纳米颗粒(24/60/120 nm),通过 BLI 检测其与 ACE2 或中和抗体的结合强度
发现纳米颗粒可显著增强亲和力(avidity effect)
3. 表位 binning(表位分组)
使用不同抗体依次结合抗原,判断是否竞争同一表位
将 12 个抗白喉毒素抗体分为 3 个表位组
4. 热稳定性分析(Thermal Shift)
检测加热后抗原与抗体结合信号变化
识别热敏感表位(如某抗体对加热抗原结合不变,提示其识别稳定构象)
5. 工艺一致性控制
通过 SAT(Single Analyte Titration)方法,定量表位占有率
批次间 CV < 20%,准确性 72–115%
来源:网络