小鼠结肠癌组织切片是研究结直肠癌(CRC)的重要实验材料,广泛应用于肿瘤发生机制、药物疗效评估、免疫微环境分析等研究。正确制备和分析这些切片对实验结果的可靠性至关重要。
组织取材与固定(关键步骤)
1. 取材时机
AOM/DSS 模型:通常在 DSS 周期结束后 7–14 天处死
观察指标:体重下降 >15%、便血、结肠缩短
2. 解剖与处理
快速取出整段结肠(盲肠至肛门)
冲洗内容物(PBS),纵向剖开
测量长度(结肠缩短是炎症标志)
记录肿瘤数量、大小、位置(拍照存档)
3. 固定
首选:4% 多聚甲醛(PFA)
室温固定 24–48 小时(避免过长导致抗原交联)
后转入 70% 乙醇长期保存
冰冻切片:OCT 包埋,液氮速冻(用于 IF、RNA 保护)
注意:若做 IHC/IF,避免使用 Bouin’s 液(破坏抗原)
来源:网络