脂肪组织特殊染色常用特殊染色方法

　　1. 油红O染色

　　原理：油红O是一种强脂溶性染料，能溶于中性脂质(甘油三酯、胆固醇酯)中，使其着色。

　　关键特点：

　　必须在冰冻切片上进行。因为石蜡包埋过程会使用有机溶剂将脂质溶解掉，而冰冻切片避免了这一步骤，完整保留了脂质。

　　染色结果：脂质被染成鲜红色或橙红色，细胞核可用苏木素等复染成蓝色。

　　主要应用：

　　显示和量化细胞内脂滴，是研究脂肪肝、动脉粥样硬化斑块内脂质的“金标准”方法之一。

　　鉴别脂肪源性肿瘤。

　　显示培养细胞中的脂滴。

　　注意：由于是冰冻切片，组织形态结构不如石蜡切片清晰。

　　2. 苏丹III & 苏丹IV(猩红)染色

　　原理：与油红O类似，都是脂溶性染料。

　　关键特点：

　　同样需要冰冻切片。

　　染色结果：苏丹III将脂质染成橙红色，苏丹IV染成鲜红色。苏丹IV比苏丹III着色更深、更鲜艳。

　　主要应用：与油红O类似，常用于显示中性脂肪。

　　3. 尼罗红染色

　　原理：一种荧光染料，其荧光特性取决于所处环境的极性。在疏水的脂质环境中发出强荧光。

　　关键特点：

　　可用于冰冻切片、细胞涂片或流式细胞术。

　　染色结果：在荧光显微镜下，中性脂质发出强烈的橘红色或金色荧光。通过调整激发光波长，还可以区分中性脂和极性脂。

　　主要应用：

　　高灵敏度地检测和定量细胞内的脂质。

　　非常适合进行共聚焦显微镜观察和图像分析。

　　4. 苏丹黑B染色

　　原理：也是一种脂溶性染料，但能染色的脂类范围更广，包括中性脂肪、磷脂和固醇等。

　　关键特点：

　　可用于石蜡切片(但脂质仍会被溶解，主要显示的是“脂质空壳”或某些磷脂)，但在冰冻切片上效果z佳。

　　染色结果：脂质被染成蓝黑色或深蓝色，对比度好。

　　主要应用：

　　显示髓磷脂，常用于神经病理学。

　　显示白细胞中的脂质颗粒。

　　作为电镜样本的预染色。

　　5. BODIPY™ 染料

　　原理：一类商业化的、性能优异的荧光染料，具有高荧光强度和光稳定性。

　　关键特点：

　　可用于冰冻切片、细胞培养。

　　染色结果：发出明亮的绿色荧光(如BODIPY 493/503)，其他衍生物可有不同颜色。

　　主要应用：

　　高分辨率成像，如共聚焦显微镜和超分辨率显微镜，以观察脂滴的精细结构和动态变化。

　　流式细胞术分选含脂滴的细胞。

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