小鼠结肠he染色样本处理流程

　　小鼠结肠 HE 染色(苏木精-伊红染色，Hematoxylin and Eosin Staining)是组织病理学中基础、常用的染色方法，用于观察结肠组织的整体结构、上皮完整性、炎症浸润、隐窝形态、杯状细胞数量及是否存在病变(如溃疡、增生、肿瘤等)。

　　样本处理流程

　　1. 取材(关键步骤)

　　安乐死后迅速取出整段结肠(从盲肠至肛门);

　　用预冷 PBS 轻柔冲洗肠腔内容物;

　　纵向剖开(沿肠系膜对侧剪开)，展平于滤纸上;

　　可选择：

　　卷片法(Swiss roll)：将结肠从远端向近端卷起，便于整段观察;

　　横切/纵切片段：取特定部位(如远端结肠)固定。

　　建议：DSS 结肠炎模型中，远端结肠病变z重，应重点取材。

　　2. 固定

　　立即放入 4% 多聚甲醛(PFA) 中，4℃ 固定 12–24 小时;

　　避免过度固定(>48 h 会导致组织变脆、抗原掩蔽)。

　　3. 脱水、透明、石蜡包埋

　　梯度乙醇脱水(70% → 85% → 95% → 100% ×2);

　　二甲苯透明(2×10 min);

　　浸蜡(60℃ 石蜡 2–3 次，每次 30–60 min);

　　包埋时注意组织方向：若做横切面，需垂直于肠长轴包埋。

　　4. 切片

　　切片厚度：4–5 μm;

　　贴附于防脱载玻片(如多聚赖氨酸或 APES 处理);

　　60℃ 烘片 1–2 小时，确保贴牢。

       来源：网络