Western Blot(蛋白免疫印迹)实验外包通常遵循一套标准化的流程。综合多家专业生物技术公司的服务规范,完整的实验外包流程及注意事项如下:
一、 实验外包标准流程
1. 需求沟通与方案定制
客户向技术服务方提出需求,提供目的蛋白的详细背景资料(如物种、分子量大小、参考文献等)。双方沟通定制具体的实验设计方案,并商定检测方式(如传统的化学发光法或荧光免疫印迹法)、费用及服务周期。
2. 签订协议与支付款项 双方确认实验方案及报价后,签订技术服务合同或委托书。客户通常需预付一定比例的定金(如70%)以启动实验。
3. 样品准备与寄送
客户按照服务方的要求准备待测样品(如新鲜或正确保存的组织、细胞或蛋白裂解液),并提供目的蛋白的一抗(也可委托服务方代买)。样品需采用干冰或液氮包装寄送,避免反复冻融和污染。
4. 开展实验(含预实验)
服务方收到样品后进入实验程序。常规流程包括:样品制备与蛋白定量、SDS-PAGE凝胶电泳、转膜、封闭、一抗与二抗孵育、ECL化学发光或荧光成像分析。部分服务方会先进行预实验(如测试不同稀释度的一抗),并将结果反馈给客户,待确认后再进行正式实验。
5. 结果交付与数据分析
实验完成后,服务方会向客户交付完整的实验报告。交付内容通常包括:电泳胶染色图、转膜后的丽春红染色图、曝光后的蛋白表达条带图、条带灰度值分析数据以及详细的实验过程记录。
6. 样品退还与售后
检测服务完成后,服务方会按照客户要求免费邮寄剩余样品。若实验出现无条带或背景过深等技术问题,部分服务方承诺提供免费优化服务。
二、 客户须知与重要提示
样品要求:通常要求动植物组织>50200mg,动植物细胞>1×10⁶10⁷个,蛋白样品浓度需达标。采样后应立刻放入液氮速冻或加入稳定剂。
抗体准备:客户需确保所提供抗体的有效性及特异性。若因客户提供的材料或抗体信息不准确导致实验延误或失败,损失通常由客户自行承担。
结果承诺:由于科学实验存在客观的不确定性,正规的服务方会保证实验结果的真实性和准确性,但通常不对“结果是否符合预期”或“是否一定能得到阳性结果”做出绝对承诺。
来源:网络