阿利新蓝染色的操作步骤

　　阿利新蓝(Alcian Blue, AB)染色是一种用于特异性显示酸性黏多糖(如硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)的经典组织化学方法，广泛应用于软骨、黏液、血管基底膜及某些肿瘤组织的研究。其操作简便、结果稳定，尤其适用于评估软骨中蛋白聚糖(proteoglycans)的含量和分布。

　　1、脱蜡至水：将蜡包埋的切片依次放入二甲苯 I、二甲苯 II、二甲苯 III 中，每个步骤持续 5 分钟。然后将切片放入无水乙醇中浸泡 1 分钟，接着放入 95% 酒精和 75% 酒精中各浸泡 1 分钟。z后，用自来水冲洗数秒。

　　2、Alcian 酸化液：滴加 Alcian 酸化液到切片上，保持 3 分钟。

　　3、阿利新蓝染液：使用 1% 的阿利新蓝染液，将切片在室温下染色 30 分钟，或者在 37°C 下染色 15 分钟。

　　4、核固红复染：将核固红复染剂滴加到切片上，保持 5-10 分钟。

　　5、乙醇脱水：将切片依次放入两次 95% 乙醇中，每次大于 2 分钟。

　　6、无水乙醇浸泡：将切片依次放入两次无水乙醇中，每次大于 2 分钟。

　　7、二甲苯浸泡：将切片依次放入两次二甲苯中，每次大于 2 分钟。z后，使用中性树胶进行封固。

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