冰冻切片HE染色的基本流程

　　组织取材与冷冻

　　新鲜组织取材(无需固定)

　　用OCT包埋剂包裹，液氮或冷台快速冷冻

　　切片

　　在冰冻切片机中切成 5–10 μm 厚的切片

　　用常温载玻片贴片(利用温差吸附)

　　固定(可选，但推荐)

　　用 95%乙醇、丙酮或乙醚-乙醇混合液 固定30秒–1分钟

　　目的：防止自溶、增强染色对比

　　HE染色(快速法)

　　苏木精染色：30秒–5分钟(可加热至60℃加快染色)

　　水洗、分化(1%盐酸乙醇，1–3秒)

　　返蓝(弱碱水或自来水)

　　伊红染色：10–60秒

　　脱水(80%、95%、100%乙醇，各1–2秒)

　　透明(二甲苯或石炭酸二甲苯，2–3秒)

　　封片

　　中性树胶封固

　　总耗时：通常在10分钟内完成，非常适合术中快速诊断。

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