河南细胞实验外包服务公司:流式检测细胞凋亡常用方法

　　1、Hoechs-PI双染色法

　　Hoechs-PI染色法的实验原理，正常细胞对染料有拒染性，荧光着色很浅，凋亡细胞主要摄取hoechs-PI染料，呈现强蓝色荧光，而坏死细胞主要摄取碘化丙啶(PI)而呈红色荧光，所以我们可以很好的区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。

　　2、DNA片段原位标记

　　DNA片段原位标记法有两种：第1种是原位缺口转移技术，它是利用DNA多聚酶I将标记的核苷酸接到断裂的3'-OH端;第2种是原位缺口末端原位标记技术，利用TdT将标记DUTP接到3'-OH端。

　　3、Annexin V联合PI法

　　这个方法可以很好的检测细胞膜成分变化，其检测原理是利用对PS有高度亲和力的Annexin V， 将Annexin V标记上荧光素，同时结合PI拒染法进行凋亡细胞双染后，用流式细胞仪检测凋亡细胞。结果的话，正常活细胞Annexin V、PI 均低染;凋亡细胞Annexin V 高染、PI低染;坏死细胞Annexin V、PI 均高染。

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