小动物活体荧光成像实验送样全流程

　　小动物活体荧光成像的送样全流程覆盖从需求对接到数据交付的全周期，各环节标准化操作直接决定成像数据质量，以下是适配生物检测平台的标准流程。

　　一、前期咨询与方案匹配

　　需求对接：用户需提前向检测平台提交实验需求，包括研究目的(肿瘤示踪/药物分布/细胞迁移等)、待测样本类型(荧光标记细胞、荧光探针、活体动物)、预期成像指标(信号强度/动态变化/多模态成像需求)。

　　方案确认：检测平台根据需求匹配z优方案，包括推荐适配的荧光探针(优先选择近红外波段650-900nm降低背景干扰)、动物模型品系(免疫缺陷鼠需额外确认饲养条件)、成像参数设置，双方确认实验周期、样本量、交付标准后签订服务协议。

　　合规准备：用户需提前提供动物实验伦理审批件(IACUC批件)，无合规批件的动物实验检测平台不予接收。

　　二、送样准备

　　荧光标记细胞送样

　　细胞需处于对数生长期，活力≥90%，稳定表达荧光蛋白的阳性率建议≥80%，需附流式检测报告。

　　冻存细胞按1×10⁶cells/管分装，DMSO浓度≤10%，干冰运输;复苏活细胞用无血清培养基重悬，4℃充氧密封运输，24小时内送达。

　　禁止寄送细菌、病毒类样本，高致病性微生物样本不予接收。

　　荧光探针送样

　　小分子探针固体粉末需加干燥剂防潮，液体溶液需用棕色避光管+铝箔双重包装，避免光降解;纳米颗粒探针根据稳定性选择4℃或-20℃运输。

　　抗体偶联探针浓度需控制在0.5-3.0mg/mL，溶于PBS，不得含叠氮钠、含胺缓冲液或BSA等载体蛋白，标记度(DOL)建议控制在1.5-3个荧光分子/抗体。

　　需随附探针的MSDS安全说明文件，注明激发/发射波长、溶解特性、稳定性要求。

　　活体动物送样

　　动物需健康状态良好，无外伤、感染，运输前禁食4-6小时(不禁水)，避免肠道内容物产生自发荧光干扰。

　　免疫缺陷鼠、重症疾病模型、术后动物、高龄转基因鼠不建议长途运输，死亡风险较高，可选择平台代购动物并在现场建模。

　　使用专用透气运输笼，保持22-25℃恒温环境，避免强光、噪音、剧烈震荡刺激。

　　三、送样运输

　　细胞/探针运输：冻存细胞用干冰冷链，复苏活细胞4℃运输，24小时内送达;探针需避光，固体粉末加干燥剂，液体样本防挥发，全程避免震荡。

　　活体动物运输：使用专用透气运输笼，保持22-25℃恒温环境，避免强光、噪音刺激，运输时长不超过12小时，免疫缺陷鼠、术后动物、重症模型不建议长途运输，可选择平台代购动物+现场建模服务。

　　四、样品接收与核查

　　检测平台接收样品后2小时内完成核查，核查内容包括：

　　样品信息完整性：核对样品名称、数量、分组信息与送样单是否一致，动物需核查品系、周龄、体重、健康状态，细胞需核查活性、荧光阳性率。

　　样品合规性：活体动物需核验伦理批件，荧光探针需核查MSDS文件，禁止接收高致病性微生物、放射性标记样本。

　　不合格处理：若样品活性不足、动物状态异常或信息缺失，检测平台将在24小时内通知用户补送或终止合作，已产生的基础服务费不予退还。

　　五、成像前预处理

　　动物预处理：成像前24小时完成目标区域脱毛，脱毛后用生理盐水清洁皮肤避免化学残留;成像前4-6小时更换无苜蓿纯化饲料或禁食(不禁水)，降低肠道自发荧光;荧光蛋白标记动物需提前24小时避光饲养。

　　样本预处理：荧光探针需提前用PBS稀释至工作浓度，细胞样本需重悬于无血清培养基中，避免血清自发荧光干扰。

　　实验分组标记：按用户提供的分组方案对动物进行耳标/趾标标记，确保成像数据与分组信息一一对应。

　　六、成像执行与数据交付

　　参数标准化：每次成像保持麻醉深度、体位、曝光时间、增益参数完全一致，多时间点动态追踪需固定同一只动物的成像参数。

　　质控设置：每批次成像需设置空白对照(未标记动物)、阳性对照(已知荧光强度的标准样本)，确保数据可重复性。

　　数据交付：交付内容包括原始成像图片、定量分析数据(信号强度/面积/动态曲线)、成像报告，可根据用户需求提供3D断层重建、光谱拆分等进阶分析服务。

       来源：网络