纳米颗粒跟踪分析仪(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)是一种基于光学显微镜和激光散射的粒度分析技术。它通过实时追踪单个纳米颗粒在液体中的布朗运动,来计算颗粒的粒径和浓度。
其工作原理可以分解为下面几个步骤
工作原理
激光照射与光散射
一束激光被聚焦并照射到含有纳米颗粒的液体样品中。样品中的纳米颗粒会使激光发生散射,在黑暗的背景下,每个颗粒都呈现为一个明亮的光点。
捕捉布朗运动
一个高灵敏度的显微镜和高速摄像机(通常以每秒30帧或更高的速率)会记录下这些散射光点的动态视频。由于受到周围液体分子的随机碰撞,纳米颗粒会进行无规则的热运动,即布朗运动。
单颗粒追踪与计算
专用软件会对录制的视频进行分析,识别并追踪每一个光点在连续帧之间的运动轨迹。软件通过计算每个颗粒的位移,得出其扩散系数(D)。
应用斯托克斯-爱因斯坦方程
这是NTA技术的核心。软件利用斯托克斯-爱因斯坦方程,将每个颗粒的扩散系数(D)转换为其流体力学直径(d)。
方程为:d = kT / (3πηD)
d: 颗粒的流体力学直径
k: 玻尔兹曼常数
T: 绝对温度
η: 液体的粘度
D: 颗粒的扩散系数
简单来说,颗粒越小,布朗运动越剧烈,扩散系数越大,计算出的直径就越小。
如何测量颗粒浓度
NTA技术的一大优势是能够直接测量颗粒浓度。由于显微镜视野的观测体积是已知的(由摄像机的尺寸和放大倍率决定),软件可以通过统计在视频中追踪到的颗粒数量,直接计算出样品中的颗粒浓度(例如,每毫升的颗粒数)。
主要应用领域
NTA技术因其独特的优势,在多个前沿领域得到广泛应用:
生物医学:作为表征外泌体和细胞外囊泡(EVs)的“金标准”技术之一,用于精确测定其粒径和浓度。同时,也用于病毒、疫苗和蛋白质聚集体的研究。
药物递送:表征脂质体、聚合物纳米颗粒等药物载体的物理特性,优化药物递送系统。
纳米材料:监测纳米颗粒的合成过程,评估其均匀性、稳定性和聚集行为。
环境科学:检测和分析水体中的纳米污染物或微塑料。
技术优势
与动态光散射(DLS)等测量群体平均值的传统技术相比,NTA具有显著优势:

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