MST 的主要应用领域

　　微量热泳技术(MicroScale Thermophoresis, MST)是一种高灵敏度、低样品消耗的生物分子相互作用分析技术，自2009年由德国 NanoTemper 公司商业化以来，已广泛应用于药物发现、基础生物学、诊断开发等领域。其核心优势在于在接近生理条件下直接测量溶液中分子的结合行为，无需固定或标记(可选)，且对缓冲液兼容性极强。

　　MST 的主要应用领域

　　1. 药物发现与筛选

　　小分子-靶点蛋白结合：

　　测定先导化合物 KdKd​ (pM–mM 范围);

　　支持片段筛选(Fragment-Based Drug Discovery, FBDD)。

　　优势：

　　可在含 DMSO(≤10%)、甘油、去垢剂的缓冲液中测试;

　　适用于难溶小分子(因用量少)。

　　案例：激酶抑制剂筛选中，MST 成功率高于 SPR(因激酶易在芯片上失活)。

　　2. 蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)

　　研究信号通路、复合物组装、抗体-抗原结合等;

　　可检测弱相互作用( Kd>100 μMKd​>100 μM )，这是 ITC/SPR 的难点。

　　技巧：用 His-tag 蛋白 + Ni-NTA 毛细管，实现免标记检测。

　　3. 蛋白质-核酸相互作用

　　转录因子-DNA/RNA 结合;

　　RNA 适配体(aptamer)筛选;

　　表观遗传修饰识别(如甲基化 DNA 结合蛋白)。

　　优势：无需放射性标记，比 EMSA 更定量。

　　4. 离子/代谢物-蛋白结合

　　金属离子(Ca²⁺、Zn²⁺)、辅因子(ATP、NADH)、代谢物与酶的结合;

　　因 MST 对电荷变化敏感，特别适合离子结合研究。

　　示例：钙调蛋白(Calmodulin)与 Ca²⁺ 的 KdKd​ 测定。

　　5. 复杂体系中的互作检测

　　MST z大优势之一：耐受复杂生物基质。

　　6. 突变体/修饰体功能表征

　　比较野生型 vs 突变体蛋白的结合能力;

　　研究磷酸化、乙酰化等翻译后修饰对互作的影响。

　　输出： KdKd​ 变化倍数 → 功能影响程度。

　　7. 诊断与生物传感开发

　　开发基于 MST 的高灵敏度检测平台;

　　用于检测疾病标志物(如 miRNA、细胞因子)。

　　优势：单次检测仅需 4–10 μL 样本，适合稀有临床样本。

       来源：网络