为什么 MST 能测到 pM 级 KD？

　　1. 超高灵敏度源于“固定靶标浓度”策略

　　MST 实验中，荧光标记的靶分子(Target)

　　配体(Ligand)进行梯度稀释(通常 16 个点，2 倍稀释)

　　即使 KD = 1 pM，只要 [Target] << KD(如 0.1–10 pM)，仍能观测到明显的结合信号变化

　　关键：MST 不依赖高浓度蛋白，反而在极低浓度下工作(pM–nM)，避免了非特异聚集或溶解度问题。

　　2. 无需固定，溶液相检测

　　分子在毛细管中自由运动，无表面吸附损失

　　特别适合膜蛋白、纳米颗粒、病毒等难处理样品

　　3. 双信号检测机制

　　现代 Monolith 仪器同时检测：

　　热泳动(Thermophoresis)：分子在温度梯度下的迁移

　　温度相关荧光(TRIC / Spectral Shift)：结合引起的局部微环境变化

　　双重信号提升信噪比，增强对弱/强结合的分辨能力

       来源：网络