肠道微生物多样性分析实验设计关键点

　　肠道微生物多样性分析是研究宿主-菌群互作、疾病机制、营养干预及药物效应的核心手段。其目标是系统评估肠道菌群的物种组成、丰度分布及功能潜力，常用 16S rRNA 基因测序(细菌/古菌) 或 宏基因组测序(全微生物组) 技术。

　　1. 样本类型

　　粪便：常用，代表结肠菌群

　　肠腔内容物：分段取样(空肠、回肠、结肠)，更精准

　　黏膜刮取物：反映黏附菌群(与免疫更相关)

　　2. 采集与保存

　　立即冻存于 –80℃(避免 –20℃)

　　可用 DNA/RNA 保护剂(如 OMNIgene·GUT、RNAlater)

　　避免反复冻融

　　3. 对照设置

　　阴性对照：无菌 PBS 经相同提取流程 → 监测试剂污染

　　阳性对照：Zymo BIOMICS Microbial Community Standard

　　4. 样本量估算

　　小鼠实验：每组 n ≥ 6–8(考虑个体差异)

　　人群研究：n ≥ 30/组(若效应量中等)

       来源：网络