MST微尺度热泳术应用与优势

　　MST应用案例

　　1. 蛋白-小分子相互作用

　　案例：2024年《Cell》杂志，AARS1蛋白与乳酸分子的相互作用

　　通过MST验证了AARS1与乳酸的结合亲和力

　　证实了β-丙氨酸对乳酸化过程的抑制作用

　　案例：2024年《Cell》杂志，GSDMD激动剂DMB与GSDMD蛋白的相互作用

　　通过MST筛选出DMB作为GSDMDz高活性激动剂

　　2. 蛋白-蛋白相互作用

　　案例：2024年《Nature Communications》杂志，ZmGDIα-hel与ZmGA2ox7.3的相互作用

　　通过MST验证了ZmGA2ox7.3与ZmGDIα、ZmGDIα-hel和P7-1的结合能力差异

　　案例：2024年《Nature》杂志，PcrIIC1与CbCas9的相互作用

　　MST测定PcrIIC1与CbCas9的Kd=2.56±0.28 μM

　　发现sgRNA表达作为异源四聚体组装的检查点

　　3. 蛋白-多肽相互作用

　　案例：2024年《Angewandte Chemie》杂志，METTL3-METTL14复合物与多肽抑制剂RSM3的相互作用

　　通过MST验证了RSM3对METTL3-METTL14复合物的抑制作用

　　案例：2020年《Molecular Plant》杂志，线虫RALF-like多肽与FER受体的结合

　　MST检测了MiRALF1/3与FERECD的亲和力(25μM和64μM)

　　六、免纯化MST技术

　　免纯化MST是MST技术的重要发展，其优势在于：

　　无需纯化蛋白：只需将目的蛋白构建为GFP融合蛋白，瞬时转染到HEK293T等细胞中

　　直接使用细胞裂解液：表达后直接制备细胞裂解液进行MST检测

　　节省时间和成本：特别适用于难以获得大量纯化蛋白的研究

　　应用案例：

　　2024年《Cell》：Chelesin与GPR146的亲和力测定

　　2024年《Nature》：谷氨酸与ASIC1a(膜蛋白)的亲和力测定

　　2021年《Cell》：胆固醇与TRKB蛋白的亲和力测定

　　七、MST仪器

　　主要设备为NanoTemper公司开发的Monolith系列仪器，如：

　　Monolith NT.115：标准MST仪器，可进行常规分子互作分析

　　Monolith NT.115pico Series：适用于更小样品量的检测

       来源：网络