等温滴定量热法(ITC)能够直接测量糖类与其他分子的相互作用过程,适用于多种糖类相关的结合研究,其主要应用场景包括:
一、适用领域
糖类与蛋白质相互作用
ITC 可直接检测糖类(如单糖、寡糖、多糖)与蛋白质结合时的热力学参数(结合常数 KD、焓变 ΔH、熵变
ΔS),例如凝集素-糖识别、酶-底物结合等。
糖类与核酸相互作用
可研究糖类(如核苷酸糖)与 DNA/RNA 的结合机制,分析稳定性和特异性。
糖类与小分子/药物结合
适用于药物载体(如环糊精)包埋糖分子的热力学分析,或药物-糖复合物的亲和力测定。
酶促糖基化反应动力学
通过监测酶(如糖基转移酶)催化糖基转移反应的热变化,计算反应速率和米氏常数。
二、技术优势
无需标记:直接检测天然状态样品,避免荧光标记对糖结构的影响。
全面参数:单次实验同步获得结合常数、化学计量比(n)、焓变与熵变。
广泛适用性:对溶液透光度、粘度要求低,适合多糖等复杂体系。
三、注意事项
样品纯度:糖类易吸湿或降解,需高纯度干燥样品以减少背景噪声。
浓度设计:建议糖类(大分子)置于样品池,滴定物浓度需显著高于结合常数(c > 10×KD)。
热效应微弱:糖类结合常伴随微弱放热/吸热,需优化仪器灵敏度。
来源:网络