HE染色,全称为苏木精-伊红染色(Hematoxylin and Eosin
staining),是组织学中最常用的一种染色方法。它通过使用两种主要染料——苏木精和伊红对生物样本进行染色,以便在显微镜下观察细胞结构和组织形态。以下是HE染色的基本原理及其步骤:

基本原理
苏木精染色:
苏木精是一种碱性染料,能够与细胞核内的酸性物质结合,主要是与染色质中的DNA以及核糖体RNA相结合。
这些酸性物质通常被称为嗜碱性(basophilic),因为它们容易接受或“喜爱”碱性染料。因此,在HE染色过程中,细胞核及富含RNA的区域(如粗面内质网)会被苏木精染成蓝紫色。
伊红染色:
伊红是一种酸性染料,可以与细胞浆和其他细胞外基质中的碱性成分结合,比如蛋白质。
细胞浆和细胞外基质中的这些成分通常是嗜酸性的(acidophilic),即倾向于结合酸性染料。在HE染色中,这些部分会被伊红染成不同程度的粉红色至红色。
染色过程概述
尽管具体的HE染色程序可能因实验室的具体条件而略有不同,但基本流程大致如下:
脱蜡和水化:如果使用的是石蜡包埋的切片,则首先需要通过一系列溶剂去除石蜡,并逐步将切片水化。
苏木精染色:将切片浸入苏木精溶液中一段时间(通常几分钟),使细胞核及其他嗜碱性结构着色。
分化:用酸性酒精溶液处理以去除过量的苏木精并增强对比度,这一过程被称为“分化”。之后需用水充分冲洗切片以终止分化作用。
蓝化:为了使苏木精染上的颜色更加鲜明,常会用弱碱性溶液(如氨水或温水)处理切片,这个步骤也叫“蓝化”。
伊红染色:随后将切片放入伊红溶液中浸泡,使细胞质和其他嗜酸性结构染上颜色。
脱水、透明和封片:最后,通过一系列递增浓度的乙醇脱水,再用二甲苯或其他透明剂透明处理,然后用树脂封片剂固定盖玻片完成整个过程。
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