染色排除法
利用某些染料只能穿透死亡细胞的细胞膜,而活细胞则能阻止染料进入,从而区分活细胞和死细胞。例如,台盼蓝染色法就是通过死细胞吸收染料而活细胞不着色来判断细胞活力。
荧光法
使用特定的荧光染料,如荧光素双醋酸酯(FDA),活细胞能选择性吸收并在细胞内转化为荧光物质,而死细胞则不吸收这些染料。通过荧光显微镜观察,可以直观地看到活细胞发出的荧光。
比色法
如MTT和CCK-8法,这些方法基于活细胞内的脱氢酶能够将特定的化合物还原,产生可溶性的有色产物,其吸光度与活细胞数量成正比。这些方法通常用于高通量筛选和细胞增殖/毒性分析。
克隆形成试验
通过计数活细胞形成的克隆数量来评估细胞的生存能力和增殖潜力。
实验应用
细胞活力测定实验在生物学和医学研究中具有广泛的应用,如:
药物筛选:通过测定药物处理后的细胞活力,评估药物的疗效和毒性。
疾病研究:通过比较正常细胞和病变细胞的活力,了解疾病的发病机制和治疗方法。
细胞生物学研究:通过测定不同条件下细胞的活力,研究细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程。
实验步骤和注意事项
实验步骤包括细胞的准备、处理、染色或加入比色试剂,以及使用相应的检测设备(如显微镜、酶标仪)来读取结果。在进行实验时,需要注意细胞的密度、培养条件、试剂的新鲜性和正确的孵育时间等因素,这些都会影响实验结果的准确性。
【隆科生物合作项目】
病理检测:石蜡包埋、切片、HE染色、masson染色、番红固绿染色、天狼星红染色、免疫组化、免疫荧光单标/双标/多标、全景扫描、激光共聚焦拍照等。
分子生物学实验:荧光定量PCR检测、Western blot检测、血常规、生化酶活、ELISA检测等。
细胞实验:耐药细胞株构建、细胞毒性实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验、细胞流式周期检测、细胞流式凋亡检测等。
动物实验:动物模型构建、动物饲养服务、动物临床前研究、药效评价、功能性评价等。
微生物学实验:抑菌试验、药敏试验、菌种鉴定、微生物多态性分析等实验。
来源:网络