蛋白免疫印迹中细胞总蛋白的提取

　　①收集细胞，加入适量的预冷的PBS洗涤细胞，然后弃去洗液，重复上述步骤三次。收集细胞沉淀放置于冰上。

　　②向细胞沉淀种加入含有PMSF的100 μl裂解液，在冰上的裂解30分钟。在裂解过程中，要定期轻轻弹动以确保细胞充分裂解。

　　③收集裂解液到1.5 ml 离心管中，在4℃下进行12000 rpm离心5分钟。

　　④将离心后的上清分装至0.5 ml 离心管中，将样品于沸水中煮5 min使蛋白变性，迅速转移到-20℃保存。

       来源：网络