根据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体的鉴定主要有三种形式:透射电镜(TEM)、粒径分析(
NTA)、蛋白标志物(WB)。
1、外泌体形态
透射电子显微镜(Transmission Electron
Microscope,简称TEM),可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2um的细微结构,这些结构称为亚显微结构或超微结构。双层囊膜结构(亚显微结构)是外泌体重要标志之一,所以透射电镜作为外泌体表征检测方式之一,可以很好的拍出外泌体双层囊膜结构,用来观察外泌体形态。

2、外泌体粒径及浓度
通过纳米颗粒示踪分析(Nanoparticle Tracking
Analysis,简称NTA)技术,可以对30-1000nm范围内的纳米颗粒进行快速实时动态检测,可对抽提获得的外泌体进行粒径大小及数量进行统计,以及初步质量评估。该技术易用、快速、稳健、准确,是对现有外泌体鉴定方法的一个良好补充。我司所使用的仪器是德国ParticleMetrix公司所生产的Zetaview-PMX120-Z。


3、外泌体表面标志物
Western
blot(WB)是通过抗原抗体特异性结合的原理,对外泌体标志蛋白进行检测,从蛋白质层面对外泌体进行鉴定。常用的外泌体标志蛋白包括CD63、TSG101及Alix等。

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