实时荧光定量PCR(quantitative real-time
PCR,qPCR)是指在PCR体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过CT值和标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。具有PCR技术快速、灵敏的特点,同时还具有更高的特异性、实时监测和可重复精确定量等优势。

荧光染料法:实验设计简单(仅需2个引物,无需设计探针),初始成本低,灵敏度高,但需要进行熔解曲线分析检验扩增反应的特异性。适用于非特异性检测(专一性要求不高或高通量检测)。
探针法:有高特异性(引物和探针共同于模板结合),高信噪比,能进行多重反应。但成本高,实验设计繁琐。适用于扩增序列专一检测。
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