a. 超速离心:
1)低速离心去除细胞和凋亡碎片,
2)更高速离心以消除更大的囊泡,
3)高速离心沉淀外泌体
注:样本的粘度与分离的外泌体纯度有显著的相关性,因此,具有高粘度的生物样品(例如血浆和血清样本)需要更长的超速离心步骤和更高的离心速度。
优点:适用从生物体液和培养基中分离外泌体。
缺点:
■ 对粘性生物流体(如血浆和血清)的提取效率较低。
■ 需配备超速离心机,包括多个离心步骤,耗时较长。
■ 需要样本量较大。

b. 试剂盒提取--基于聚合物的沉淀技术
基于聚合物的沉淀技术通常包括将样本与含聚合物的沉淀溶液混合,在4℃温育并低速离心。用于聚合物沉淀的最常见聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。用这种聚合物沉淀具有许多优点,包括对分离的外泌体影响小、pH中性等。目前大多数快速分离外泌体的商品化试剂盒都是基于此方法。
然而基于聚合物的沉淀方法可能会同时分离非囊泡污染物(包括脂蛋白)而且,聚合物材料的混杂可能会影响下游分析。
来源:网络