mts法检测细胞增殖标准操作流程

　　MTS法是一种用于检测细胞增殖与活力的比色分析方法，属于MTT类四唑盐检测技术的改进型。它通过测量活细胞代谢活性间接反映细胞数量，广泛应用于药物筛选、细胞毒性评价、生物材料相容性测试等领域。

　　MTS法的操作流程非常简便，是典型的“混合-孵育-检测”一步法。

　　细胞接种与铺板：

　　将对数生长期的细胞以z佳密度(需预实验确定)接种到96孔板中，每孔通常加入100μL培养基。

　　关键：设置对照组!

　　空白组： 只有培养基，无细胞。

　　对照组： 只有细胞，不加处理。

　　实验组： 加入不同浓度药物或处理的细胞。

　　每组建议设置3-6个复孔。

　　细胞处理与培养：

　　将细胞板在37°C，5% CO₂培养箱中培养至适当状态(如贴壁后)，加入待测药物处理一定时间(如24、48、72小时)。

　　配制并加入MTS工作液：

　　按照说明书将MTS溶液和PMS溶液按比例混合，配制成MTS工作液。注意： PMS对光敏感，应避光操作。

　　直接向每孔中加入20μL MTS工作液(以100μL培养基为例，体积比为1:5)。

　　轻轻摇晃细胞板混匀。

　　孵育与显色：

　　将细胞板放回CO₂培养箱，避光孵育1-4小时。

　　孵育时间需优化： 时间过长可能导致毒性，过短则信号弱。可通过酶标仪动态监测，待对照组的OD值达到0.8-1.5时为宜。

　　检测吸光度：

　　孵育结束后，直接从培养箱中取出细胞板。

　　使用酶标仪，在490nm波长处测量各孔的吸光度值。

       来源：网络