SDS-PAGE蛋白质分析的原理

　　SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate - Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质分析技术，广泛应用于生物化学、分子生物学以及蛋白质组学研究中。这项技术z初由乌尔里希和考伯斯在1967年提出，它利用了聚丙烯酰胺凝胶作为分离介质，并借助十二烷基硫酸钠(SDS)和β-巯基乙醇等试剂使蛋白质变性及电荷均一化，从而实现蛋白质根据其分子量大小进行分离的目的。下面是对SDS-PAGE技术的详细说明：

　　 原理

　　蛋白质变性与电荷均一化：SDS是一种阴离子去污剂，能够破坏蛋白质的二级和三级结构，使其完全变性并形成线性结构。同时，SDS与蛋白质按一定比例结合(大约1.4g SDS/1g蛋白质)，为每个氨基酸残基提供一个负电荷，从而使蛋白质的电荷与分子量直接相关，而与其原有的电荷状态无关。

　　聚丙烯酰胺凝胶：凝胶由两部分组成，浓度不同的分离胶和浓缩胶。浓缩胶具有较低的聚丙烯酰胺浓度，通常含有一定梯度的氯化物或甘氨酸，形成电荷对峙层，帮助样品集中成一条窄带进入分离胶;分离胶则具有更高的聚丙烯酰胺浓度，用于根据蛋白质分子量进行精确分离。

　　电泳过程：在电场作用下，蛋白质-SDS复合物因其均匀的负电荷而在凝胶中向正极迁移，分子量小的蛋白移动得更快，分子量大的蛋白移动得更慢，从而实现按分子量从低到高分离。

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