显色原位杂交 (CISH)和荧光原位杂交 (FISH)的区别

　　显色原位杂交(CISH)和荧光原位杂交(FISH)都是用于定位固定组织和细胞中特定核酸靶标(DNA或RNA)的强大技术，它们都依赖于核酸探针与样本的特异性结合。然而，两者在信号检测方式、仪器需求以及应用优势上存在显著区别。

　　下面是这两种技术的核心差异对比：

　　1. 标记物与可视化原理

　　CISH(显色)：使用非荧光的半抗原(如生物素、地高辛)标记探针。通过酶促反应(如过氧化物酶或碱性磷酸酶催化)，使显色底物产生不溶性的有色沉淀(如棕褐色、红色等)来对目标核酸进行染色。

　　FISH(荧光)：使用直接带有荧光素或间接带有生物素/地高辛的探针。利用报告分子与荧光素标记的特异亲和素发生免疫化学反应，在激发光下发出荧光信号。

　　2. 观察仪器与放大倍数

　　CISH：结果可在常规的普通光学显微镜(明视野)下观察，通常40倍放大倍数即可分辨信号。

　　FISH：必须配备适当滤光片的荧光显微镜(或共聚焦显微镜)及CCD相机来观察荧光信号，通常需要60-100倍的高放大倍数才能实现z优成像。

　　3. 多重检测能力

　　CISH：虽然也可以进行多色CISH，但与FISH相比操作要困难得多。

　　FISH：具有显著的多重检测优势。通过使用不同光谱的荧光基团标记不同的探针，可以在同一个细胞核内同时显示多种颜色，直观地解析多个遗传元件或多基因表达模式(即多色FISH/mFISH)。

　　4. 组织形态学评估

　　CISH：能够在组织形态学的背景下获取遗传信息。如果切片适当复染，病理学家可以同时在普通光镜下清晰地观察组织的整体形态结构和基因异常。

　　FISH：对细胞特征(大小和形状)的评估相对有限，形态学背景不如CISH清晰。

　　5. 信号稳定性与存档

　　CISH：产生的有色沉淀物非常稳定，不会随时间褪色，染色后的切片可以像其他常规病理切片一样长期保存和随时复查。

　　FISH：荧光信号会随着时间的推移逐渐减弱(淬灭)，不利于长期存档。

　　6. 成本与设备门槛

　　CISH：总体成本中等偏低，无需昂贵的荧光设备，完美适配各级医院病理科现有的标准化工作流程。

　　FISH：需要专用的荧光显微镜及图像分析软件，设备和维护成本较高，且对操作人员的专业培训要求更高。

　　总结：

　　如果您需要在单一样本中同时检测多个靶点，或者对低丰度目标进行检测，FISH是更好的选择;如果您更看重结果的长期保存、希望将基因检测结果与常规HE染色的组织形态完美结合，且受限于实验室设备条件，那么CISH则更具性价比和操作便利性。

       来源：网络