透射电镜原理及应用详解
透射电镜(TEM)是一种利用高速电子束穿透样品的高分辨率成像技术,其原理基于电子与物质的相互作用。
行业信息
透射电镜(TEM)是一种利用高速电子束穿透样品的高分辨率成像技术,其原理基于电子与物质的相互作用。
磷钨酸,一般用双蒸水配制成10-30g/L的溶液(pH6.4-7.0),常用于病毒、细菌、纳米聚合物等样品染色。
负染色又称阴染色,是相对于普通染色(称正染色)而言。所谓负染,是指通过重金属盐加强样品外周的电子密度,使样品显示负的反差,衬托出样品的形态和大小。
铺板时一般选择6孔板,因为6孔板大小适中,可保证有相当距离的平直划痕,便于观察、误差也很小。
冰冻切片的优点:能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。
阳性着色细胞计数法:在镜下,随机选择不重叠的 几个视野,人工或机器计数阳性着色细胞。
抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条;
体外抗菌试验灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
冷冻扫描电镜样品制备:首先,将样品快速冷冻,一般采用液氮或其他冷冻设备瞬间冷却至低温状态,以确保样品结构的瞬时固定。
超速离心法(差速离心和密度梯度离心):操作繁琐,耗时长,分离外泌体纯度较高,但得率低,目前分离外泌体主流方法。